Pipeta

Los colegas que venden pipetas suelen recibir preguntas de clientes recomendados: "¿Puede darme un juego de pipetas? Se pueden utilizar en todos los rangos de medición, como un juego de cuatro". A petición de los clientes, generalmente se recomiendan pipetas con cuatro rangos de medición de 0,5 a 10 uL, 5 a 50 uL, 10 a 100 uL y 100 a 1000 uL. A primera vista, parece que lo que el cliente compra cubre casi toda la gama de micropipetas, y parece que todo se hace a la perfección, ¡pero no es así! Después de muchos años de trabajo posventa de pipetas, hemos recopilado comentarios de los clientes sobre problemas como el pipeteo incorrecto y la dificultad de uso, que a menudo surgen de la selección inicial del juego.Tomemos el ejemplo más común: los clientes suelen dar la mayor cantidad de comentarios sobre el pipeteo cuando usan una pipeta de 10 uL para transferir líquidos dentro de 1 uL. En teoría, una pipeta con un rango de medición de 0,5 a 10 uL no tiene problemas cuando se utilizan líquidos entre 0,5 y 1 uL. ¿Por qué los clientes suelen informar la mayoría de los problemas en este rango de medición? Por debajo de 1uL es una operación de líquido ultramicro. La cantidad de líquido es casi invisible a simple vista. Las habilidades básicas de operación de líquidos son muy altas, como: enjuague, profundidad de inserción y otros detalles técnicos. Por ejemplo: detalles técnicos como enjuague, profundidad de nivel de líquido de inserción, etc. Además, la calidad del cabezal de succión también tiene un gran impacto en esta operación de microvolumen. Algunas puntas de succión de mala calidad tendrán rebabas de plástico residuales en el extremo del cabezal de succión. Estas puntas de mala calidad tienen efectos casi fatales en la micropipeta. Cuando se utilizan puntas de calidad normal, la mayoría de los operadores optan por utilizar pipetas con un rango de 0,1-2 uL. Para operaciones de transferencia de líquidos por debajo de 1 uL, el efecto de pipeteo es significativamente mejor que el de las pipetas con un rango de 0,5 a 10 uL.A continuación tomamos la pipeta Yanbio como ejemplo para ilustrar:El rango general de pipetas ajustables de precisión ordinarias está entre 0,1 uL y 10 ml. Los diferentes rangos se muestran en la siguiente tabla:Nombre del artículoCat.No.Volumen nominalRango de volumenIncrementoPipeta monocanalYB-P2.52,5 µL0,1-2,5 µL0,05 µLYB-P1010 µl1-10 µl0,1 µLYB-P2020 µL2-20 µl0,1 µLYB-P100100 µl10-100 µL1 µlYB-P200200 µL20-200 µl1 µlYB-P10001000 µL100-1000 µL5 µlYB-P50005000 µL1000-5000 µL50 µlYB-P1000010 mililitros1-10 ml100 µlPipeta de 8 canalesYB-PM1010 µl1-10 µl0,1 µLYB-PM100100 µl10-100 µL1 µlYB-PM300300 µL50-300 µL1 µlYB-PM10001000 µL100-1000 µL5 µl Los diferentes modelos de pipetas tienen diferentes rangos. Cuando elegimos una pipeta, muchas veces nos aparecerá un rango determinado, pudiendo bastar con varias pipetas de diferentes modelos. Cómo elegir la pipeta con el volumen más adecuado.Ejemplo: se requiere una pipeta y el volumen que se suele pipetear es de 20 uL. Tenemos cuatro tipos diferentes de dispensadores de líquido disponibles de 2-20 uL (modelo YB-P20) / 5-50 uL (modelo YB-P50) / 10-100 uL (modelo YB-P100) / 20-200 uL (modelo YB-P200). ¿Qué pipeta tiene el error más pequeño a 20 uL?De acuerdo con nuestra rutina diaria de selección de productos, creemos que sería más apropiado si el volumen objetivo está en el rango medio, y elegiremos empíricamente 5-50uL (modelo YB-P50). ¿Es este el caso? Echemos un vistazo a los resultados de los datos:Utilicemos estos cuatro tipos de pipetas para hacer un análisis de errores:Gato. No.:VolumenError a 20 ulYB-P2020-20 ul±0.2uLYB-P505-50 ul±0.5uLYB-P10010-100 ul±0.6uLYB-P20020-200 ul±1.0uLSe puede ver que la pipeta de 2-20 uL es la más adecuada en términos de exactitud y precisión, y el volumen objetivo de 20 uL es el más adecuado.     

La PCR, la técnica revolucionaria que amplifica pequeñas trazas de ADN/ARN en cantidades manejables, es fundamental en los laboratorios modernos. Sin embargo, incluso los investigadores más experimentados a veces experimentan dificultades. Tanto si se inicia en el mundo de la biología molecular como si busca perfeccionar sus habilidades, esta guía le guiará por las mejores prácticas de PCR y cómo... instrumento de laboratorio Puede hacer toda la diferencia.El corazón de la amplificación: su máquina de PCREn el núcleo de cada reacción de PCR se encuentra la máquina de PCR, también conocido como termociclador. Este sofisticado instrumento de laboratorio automatiza el ciclo térmico Proceso: calentamiento y enfriamiento rápido de muestras para facilitar la desnaturalización, la hibridación y la extensión. Los termocicladores modernos ofrecen una precisión increíble y muchos incorporan funciones avanzadas como la función de gradiente, que permite probar múltiples temperaturas de hibridación en una sola ejecución. Esto resulta fundamental para optimizar los ensayos y ahorrar tiempo.Solución de problemas 101: Los controles lo son todoNo importa cuán avanzado sea tu nivel máquina de PCR Es decir, un buen diseño experimental es irremplazable. ¡Siempre incluya controles!Si tu control positivo No amplifica, el problema podría estar en tus reactivos, plantilla. ADN/ARN, o la tciclo térmico ajustes.Revise su mezcla maestra: ¿se agregaron correctamente todos los reactivos? pipeta ¿calibrado?Evaluar la calidad de la plantilla: ¿es su ADN/ARN ¿degradado o impuro?Verificar el máquina de PCR calibración: ¿está realizando cada ciclo térmico ¿correctamente?Si tu control negativo Si muestra amplificación, es probable que haya contaminación. Utilice siempre puntas con filtro y áreas específicas para pre y post PCR para evitar la contaminación por amplicones.Aumentar la especificidad en la amplificación¿Problemas de especificidad? No estás solo. Las bandas no deseadas o el bajo rendimiento a menudo se pueden solucionar con estas estrategias:Utilice polimerasas de arranque en calientePruebe el aterrizaje o la pendiente PCROptimice las condiciones de su ciclo térmicoPero lo más importante: ¡diseña tus primers con inteligencia!Utilice cebadores de 18 a 24 pb con una temperatura entre 50 y 60 °C.Verifique el contenido de GC (40–60% es lo ideal)Evite repeticiones y secuencias autocomplementariasValidar con un gradiente máquina de PCR para encontrar la temperatura de recocido perfectaInstrumentos de laboratorio que optimizan su flujo de trabajo de PCRSu máquina de PCR es esencial, pero otros instrumentos de laboratorio son igualmente críticos para el éxito.Pipetas: La precisión es fundamental. Las pipetas electrónicas con modos de dispensación múltiple aceleran la preparación de la mezcla maestra y reducen el esfuerzo repetitivo. Para laboratorios de alto rendimiento, las pipetas de 96 canales o las estaciones de trabajo de manejo de líquidos pueden ser revolucionarias.Cicladores térmicos Con función de gradiente: Como se mencionó, no todas las máquinas de PCR son iguales. Invertir en un termociclador con una función de gradiente precisa permite optimizar los ensayos más rápidamente y con menos desperdicio de reactivos.Consejos finales para la excelencia en PCRUtilice siempre agua purificada de alta calidad. ADN/ARN.Calibre su pipeta periódicamente.Deja que tu máquina de PCR Sea su socio: comprenda sus características, manténgalo y verifique su calibración.En caso de duda, ejecute un gradiente ciclo térmico.La PCR es tanto un arte como una ciencia. Con atención al detalle y los instrumentos de laboratorio adecuados, desde una pipeta fiable hasta una máquina de PCR de alta precisión, obtendrá resultados reproducibles y listos para publicar en todo momento.